重组人MG53蛋白对人脐带间充质干细胞氧化损伤的保护作用

作     者：黄团结 宋及时 马珊珊 程康 邢衢 李鹏 刘腾飞 杨波 关方霞 Huang Tuanjie;Song Jishi;Ma Shanshan;Cheng Kang;Xing Qu;Li Peng;Liu Tengfei;Yang Bo;Guan Fangxia

作者机构：郑州大学生命科学学院450001 郑州大学第一附属医院神经外科450052 

基　　金：国家自然科学基金(81601078 81471306) 河南省国际人才合作项目(2016GH03 2016GH15) 

出 版 物：《中华细胞与干细胞杂志（电子版）》 (Chinese Journal of Cell and Stem Cell（Electronic Edition）)

年 卷 期：2017年第7卷第1期

页      码：35-44页

摘      要：目的建立人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)的H_2O_2氧化损伤模型,探讨重组人MG53蛋白(rh MG53)对h UC-MSCs氧化损伤的保护作用。方法使用组织块培养法从健康人脐带沃顿胶组织中分离培养h UC-MSCs,流式细胞仪检测细胞表型;CCK-8法检测h UC-MSCs的增殖和H_2O_2损伤程度。实验分为正常对照组(NC组)、rh MG53组、H_2O_2组和H_2O_2+rh MG53组。分别采用CCK-8法、Transwell小室、流式细胞术和β-半乳糖苷酶染色检测rh MG53蛋白对h UC-MSCs增殖、迁移、周期凋亡和衰老的影响。各组、各个时间点的吸光值采用析因设计的方差分析,组间比较采用单因素方差分析。结果 h UC-MSCs贴壁呈梭型生长,高表达间充质干细胞标志CD44、CD133、HLA-ABC,低表达CD34、CD45;H_2O_2对h UC-MSCs具有浓度和时间依赖性的损伤作用,确定200μmol/L的H_2O_2处理16 h为h UC-MSCs氧化损伤的最适条件。与NC组相比,H_2O_2组细胞增殖(0.994±0.011 vs 1.331±0.014)、迁移率(8.15﹪±2.47﹪vs 33.34﹪±3.62﹪)和S期细胞比例(29.67﹪±3.69﹪vs 34.33﹪±4.25﹪)显著降低,细胞衰老(44.07﹪±5.26﹪vs 5.7﹪±1.42﹪)和凋亡比例(52.63﹪±5.76﹪vs 4.65﹪±1.23﹪)显著增加,差异具有统计学意义(均P0.05),细胞衰老(3.92﹪±1.31﹪vs 5.7﹪±1.42﹪)和凋亡比例(3.96﹪±1.06﹪vs 4.65﹪±1.23﹪)显著降低,差异具有统计学意义(均P<0.05)。与H_2O_2组相比,H_2O_2+rhMG53组细胞增殖(1.252±0.056 vs 0.994±0.011)、迁移率(18.93﹪±3.12﹪vs8.15﹪±2.47﹪)和S期比例(34.84﹪±3.45﹪vs 29.67﹪±3.69﹪)显著提高,细胞衰老(17.89﹪±2.64﹪vs 44.07﹪±5.26﹪)和凋亡比例(4.65﹪±1.23﹪vs 17.63﹪±2.56﹪)显著降低,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论 rhMG53对H_2O_2造成的h UC-MSCs氧化损伤有保护作用。

主 题 词：磷蛋白类 脐带 间质干细胞 创伤和损伤 保护 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100101[100101] 10[医学] 

D　O　I：10.3877/cma.j.issn.2095-1221.2017.01.007

馆 藏 号：203232232...