水貂肠炎病毒VP2基因的原核表达及多克隆抗体的制备

作     者：卞赛赛 梁琳 高窦 周灵 李沛然 杨双双 雷程红 崔尚金 刘维全 

作者机构：新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052 中国农业科学院北京百牧罟医讲究所北京100193 中国农业大学生物学院北京100193 

基　　金：国家高技术研究发展计划(863)项目(2011AA10A213) 中国农业科学院创新工程项目(ASTIP-IAS15) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2017年第47卷第5期

页      码：597-602页

摘      要：利用原核表达系统表达水貂肠炎细小病毒(MEV)VP2衣壳蛋白,以制备抗VP2超免疫血清。根据VP2的基因序列,设计1对特异性引物,以MEV全基因组重组质粒p B-MEV-L为模板,利用PCR技术扩增出MEV VP2片段,并定向克隆到pET-32a载体中,经酶切与序列测定,证明成功构建了VP2基因原核表达质粒pET-MEV-VP2。将其转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后实现了高效表达。免疫印迹试验表明,获得的重组蛋白具有较好的反应原性。以该蛋白为免疫原免疫新西兰兔,制备抗血清,四免后用ELISA方法检测其效价达到1∶1 024。免疫荧光试验证明,获得的抗体具有良好的结合活性。为MEV的病原生物学研究奠定基础。

主 题 词：水貂肠炎病毒 VP2 原核表达 抗血清 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2017.05.011

馆 藏 号：203232682...