TAIL-PCR研究进展及其在畜牧兽医中的应用

作     者：马玲 王志强 覃绍敏 吴健敏 MA Ling;WANG Zhi-qiang;QIN Shao-min;WU Jian-min

作者机构：广西兽医研究所/广西动物疫病痛原生物学与诊断重点实验室南宁530001 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室南宁530004 广西大学生命科学与技术学院南宁530004 

基　　金：国家自然科学基金项目(31260613) 广西自然科学基金项目(2013GXNSFBA019123) 广西畜禽疫苗新技术重点实验室开放基金项目(14-045-31-B-5) 

出 版 物：《南方农业学报》 (Journal of Southern Agriculture)

年 卷 期：2017年第48卷第5期

页      码：926-932页

摘      要：热不对称交错PCR(TAIL-PCR)是一种以PCR为基础的染色体步移,主要用于分离已知基因的侧翼序列,具有简便、快速、高效、特异性强等特点。文章从TAIL-PCR的原理、优势及局限性、反应体系优化等方面对TAIL-PCR的研究进展进行综述,其中在畜牧兽医中主要用于已知基因侧翼克隆和转基因动物模型外源基因插入位点确定。但由于基因组DNA的庞大和复杂性,使得从基因组中克隆获得目的基因仍存在诸多限制因素,如特异性引物错配和随机引物结合位点不确定,易造成非特异性产物的产生;模板GC含量异常或存在高度重复序列时,即使使用多种简并引物也难以获得阳性产物。因此,应根据实际情况对TAIL-PCR进行灵活调整。当模板较复杂时,可借鉴连接介导PCR原理,给引物加上接头,提高扩增反应的特异性;当模板较简单或序列较清晰时,可根据模板特点(如高GC含量)或已知模板序列设计引物、调整反应条件,增加操作的简便性;还可参考Suppression-PCR原理,选择引物和反应条件,获得较长的扩增片段。此外,TAIL-PCR可与多种技术联合使用,促使其在畜牧兽医中获得更广泛深入的应用。

主 题 词：TAIL—PCR 染色体步移 研究进展 应用 

学科分类：08[工学] 09[农学] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.2095-1191.2017.05.028

馆 藏 号：203233705...