基于分子克隆方法制备标准分子量片段混合物

作     者：马温华 陈曼 裴雪 王邦义 王超群 赵兴春 王乐 Ma Wenhua;Chen Man;Pei Xue;Wang Bangyi;Wang Chaoqun;Zhao Xingchun;Wang Le

作者机构：公安部物证鉴定中心法医遗传学公安部重点实验室公安部物证鉴定中心北京市现场物证检验工程技术研究中心北京100038 湖北医药学院湖北十堰442000 

基　　金：中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(2012JB001 2013JB003 2016JB004) 公安部科技强警基础工作专项(2014GABJC041) 公安部技术研究计划项目(2016JSYJC14) 

出 版 物：《中国法医学杂志》 (Chinese Journal of Forensic Medicine)

年 卷 期：2017年第32卷第3期

页      码：245-248页

摘      要：目的制备标准分子量DNA片段混合物。方法选取pMD18-T载体部分序列作为插入片段,设计引物,制备包含不同大小的标准分子量片段的克隆。大量培养细菌提取质粒,用双酶切、连接荧光接头的方法制备不同大小的带有荧光的标准分子量片段,混合,纯化,最终获得标准分子量片段混合物(内标)。结果用分子克隆方法制备出具有实用性的标准分子量片段混合物,其单个标准分子量片段大小分别为80bp、124bp、194bp、224bp、254bp、304bp、349bp、399bp、424bp、454bp。并且这些标准分子量片段混合物可以准确地对DNATyper15试剂盒的扩增产物进行检测。结论应用该方法制备了能满足研究和实验室要求的标准分子量片段混合物,为DNA分子量标准物标准品的制作提供了一种新的方法。

主 题 词：法医物证学 分子克隆 荧光接头 标准分子量片段 毛细管电泳 

学科分类：1001[医学-基础医学] 08[工学] 0838[0838] 100105[100105] 10[医学] 

D　O　I：10.13618/j.issn.1001-5728.2017.03.004

馆 藏 号：203233849...