荧光定量PCR方法在沙门菌鉴定中的应用

作     者：赵雪涛 陈军 刘志勇 ZHAO Xue-tao 1,CHEN Jun 2,LIU Zhi-yong 1 (1.Shanghai Xuhui district Center for Disease Control and Prevetion, 200002 Shanghai China;2.Shanghai Huangpu District Sanitary Test Institute, 200002 Shanghai China )

作者机构：上海市徐汇区疾病预防控制中心上海200002 上海市黄浦区卫生检验所上海200002 

出 版 物：《上海预防医学》 (Shanghai Journal of Preventive Medicine)

年 卷 期：2005年第17卷第2期

页      码：64-66页

摘      要：[目的 ]　用taqman技术建立沙门菌荧光定量聚合酶链反应 (PCR)检测方法 ,尝试快速、准确地鉴定沙门菌。　 [方法 ]　根据沙门菌GenBankAccessionNOU2 5 3 5 2基因序列 ,设计并合成引物和荧光标记探针。将PCR扩增的沙门菌基因片段克隆导入载体 ,构建的重组质粒经筛选、鉴定后 ,作为阳性模板 ,用于标准曲线的制定。利用荧光定量聚合酶链反应 (PCR)技术进行各类菌株的定性鉴定。　 [结果 ]　应用重组质粒制作的定量曲线 ,其循环阈值与模板浓度的对数值具有良好的线性关系 ,相关系数为 0 .999。检测各类菌株 ,其中沙门菌 41株、H抗原丢失的沙门菌 16株均阳性 ;非沙门菌 10 9株均阴性。　 [结论 ]　建立了鉴定沙门菌的荧光定量PCR方法 ,该方法简便、快速、准确 。

主 题 词：荧光定量聚合酶链反应 沙门菌 荧光标记探针 定量曲线 循环闽值 模板浓度 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 07[理学] 071005[071005] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-9231.2005.02.004

馆 藏 号：203234045...