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pcDNA3.1(+)/NspA真核表达载体的构建及鉴定

pcDNA3.1(+)/NspA真核表达载体的构建及鉴定

作     者:谢良伊 胡四海 唐湘云 杨胜辉 余敏君 

作者机构:南华大学病原生物研究所湖南衡阳421001 湖南环境生物职业技术学院附属医院 

基  金:湖南省自然科学基金(05JJ30045) 

出 版 物:《实用预防医学》 (Practical Preventive Medicine)

年 卷 期:2006年第13卷第1期

页      码:8-10页

摘      要:目的构建pcDNA3.1(+)淋病奈瑟菌外膜蛋白—奈瑟菌表面蛋白A(Neisseria surface Protein A,NspA)基因真核表达载体,为研制淋病奈瑟菌核酸疫苗奠定基础。方法根据淋病奈瑟菌NspA基因序列,设计合成一对引物,用PCR方法从淋病奈瑟菌基因组DNA中扩增出NspA基因片段,将扩增的产物连接于测序载体pUCm-T上,并构建重组体pcDNA3.1(+)/NspA,进行酶切、PCR及测序鉴定。结果NspA基因体外扩增产物大小约为525 bp。所构建的pcDNA3.1(+)/NspA重组体经双酶切及PCR鉴定,与预期片断的大小相符;测序结果与GenBank中收录的NspA全长序列一致,表明pcDNA3.1(+)/NspA真核表达载体构建正确。结论成功地构建了淋病奈瑟菌真核重组表达载体pcD-NA3.1(+)/NspA,为NspA蛋白的功能研究和淋病奈瑟菌核酸疫苗的研制提供了物质基础。

主 题 词:淋病奈瑟菌 表面蛋白A pcDNA3.1(+) 克隆 疫苗 

学科分类:1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1006-3110.2006.01.003

馆 藏 号:203234251...

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