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应用UV-X-IP分析酿酒酵母HSF和靶DNA的相互作用

应用UV-X-IP分析酿酒酵母HSF和靶DNA的相互作用

作     者:刘开辉 丁小维 邓百万 陈文强 张乐民 LIU Kai;DING Xiao-wei;DENG Bai-wan;CHEN Wen-qiang;ZHANG Le-min

作者机构:陕西理工学院陕西省资源生物重点实验室陕西汉中723001 云南大学云南省生物资源保护与利用重点实验室云南昆明650091 

基  金:陕西省教育厅重点科研项目(03JK027) 

出 版 物:《食品与生物技术学报》 (Journal of Food Science and Biotechnology)

年 卷 期:2008年第27卷第3期

页      码:109-113页

摘      要:利用紫外激光交联和免疫沉淀技术(UV laser crosslinking and immunoprecipitation,UV-X-IP)分析原核表达的酿酒酵母热激因子(heat shock factors,HSFs)和片段化的基因组靶DNA的相互作用。分别在ScSSA1、ScSSA4启动子区和编码区设计引物对免疫沉淀的DNA进行PCR分析。结果发现,紫外激光交联和免疫沉淀DNA库中富集了ScSSA1、ScSSA4启动子区HSF结合的DNA片段,而没有编码区DNA,表明HSF特异结合了靶DNA。从未经紫外激光交联样品的免疫沉淀DNA库中未获得相应PCR扩增产物,说明紫外激光在酿酒酵母HSF与靶DNA之间形成共价结合中起重要作用。

主 题 词:紫外激光交联 免疫沉淀 酿酒酵母 热激因子 靶DNA 

学科分类:0832[0832] 08[工学] 083201[083201] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:1673-1689.2008.03.023

馆 藏 号:203234409...

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