纳米羟基磷灰石颗粒能够影响大鼠腹腔单核巨噬细胞的凋亡吗？

作     者：丁婷婷 孙皎 Ding Ting-ting;Sun Jiao

作者机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院上海生物材料研究测试中心上海市口腔医学重点实验室上海市200023 

基　　金：国家自然科学基金项目(30470479) 上海市科委项目(08DZ2291600,0752nm026) 上海市重点学科建设项目(S30206) 

出 版 物：《中国组织工程研究与临床康复》 (Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2009年第13卷第51期

页      码：10093-10096页

摘      要：背景:由于尺寸效应,纳米颗粒可以结合细胞内大分子从而引起细胞坏死或凋亡。针对纳米颗粒的生物安全性,目前缺乏对颗粒致细胞凋亡的机制分析。目的:从细胞及分子水平,探讨纳米羟基磷灰石颗粒对大鼠腹腔单核巨噬细胞凋亡的影响。设计、时间及地点:材料-细胞学体外观察,于2007-01/2008-12在上海生物材料研究测试中心完成。材料:2级SD雄性大鼠购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司,纳米颗粒由中科院硅酸盐所提供。方法:无菌条件下吸取大鼠腹腔液,贴壁法体外分离培养单核巨噬细胞,调整细胞浓度为2×109L-1。在300W/40kHz超声条件下制备含20,100,200mg/L纳米羟基磷灰石颗粒的悬浮液,分别诱导单核巨噬细胞24h,并设立正常对照组。主要观察指标:应用透射电镜观察细胞超微结构表征;AnnexinV-EGFP/PI双染检测细胞凋亡率;WesternBlot法检测凋亡调控相关基因P53的表达变化。结果:正常对照组单核巨噬细胞伪足完整、核膜正常、核质均匀;20,100,200mg/L纳米羟基磷灰石诱导24h后,单核巨噬细胞具有典型的凋亡形态学特征。与正常对照组比较,20,100mg/L纳米羟基磷灰石诱导后细胞凋亡率均显著升高(P<0.01),且100mg/L诱导组升高幅度明显大于20mg/L组(P<0.05)。正常对照组单核巨噬细胞中几乎不表达P53蛋白;经不同质量浓度的纳米羟基磷灰石诱导后,单核巨噬细胞P53蛋白的表达均明显增高,且蛋白的表达与纳米颗粒的质量浓度呈正相关。结论:纳米羟基磷灰石颗粒能够通过蛋白磷酸化上调P53蛋白的表达,从而启动下游相关基因,最终导致细胞凋亡。

主 题 词：纳米羟基磷灰石 颗粒 凋亡 P53 

学科分类：0831[工学-公安技术类] 08[工学] 0836[0836] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-8225.2009.51.018

馆 藏 号：203234482...