核黄素合酶基因RNAi表达载体的构建

作     者：任秀艳 乔洁 张江丽 REN Xiu-yan;QIAO Jie;ZHANG Jiang-li

作者机构：廊坊师范学院生命科学学院河北廊坊065000 

基　　金：廊坊师范学院科学研究资助项目(LSZB201002) 

出 版 物：《西南农业学报》 (Southwest China Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2012年第25卷第3期

页      码：997-1000页

摘      要：根据拟南芥RS基因的编码序列设计引物,利用PCR技术从pGADT7-RS重组质粒上扩增到RS基因编码区476 bp片段。利用双链RNA介导的基因沉默技术,构建RS基因沉默表达载体,为进一步研究该基因在植物与蛋白激发子HpaGXoo互作中的功能及其作用机制奠定基础。首先将RS基因片段连接到pUCm-T载体上,用Pst I/BamH I和Pst I/Xho I分别对pUCm-RS重组载体进行酶切,得到2个RS基因片段;先后将其连接到用相应限制酶酶切的pBSSK-in载体上,构建成pBSSK-RS-in-RS重组载体,该重组载体中的2个RS片段大小一致,反向重复;最后用Sac I/Kpn I酶切pBSSK-RS-in-RS载体得到RS-intron-RS片段,连入表达载体pCAMBIA1301中,构建成该基因的沉默表达载体。

主 题 词：RS基因 基因沉默 载体构建 

学科分类：09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090202[090202] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-4829.2012.03.052

馆 藏 号：203234595...