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人胰岛素样生长因子-1在大肠杆菌中的表达

人胰岛素样生长因子-1在大肠杆菌中的表达

作     者:吴岚晓 李明 王萍 陈白虹 

作者机构:第一军医大学热带医学研究所广州510515 

基  金:国家科委新药开发项目 ( 10 35计划 ):编号 96 90 1 0 1 5 7 

出 版 物:《药物生物技术》 (Pharmaceutical Biotechnology)

年 卷 期:2001年第8卷第4期

页      码:185-188页

摘      要:为获得大量的人胰岛素样生长因子 1(humanInsulin likeGrowthFactor 1,hIGF 1)产品 ,构建了hIGF 1原核表达系统。设计引物 ,引入NdeⅠ和HindⅢ酶切位点 ,以人工合成构建的 pUCIGF质粒为模板 ,PCR扩增hIGF 1基因。酶切后 ,克隆于原核表达载体pRSETB中 ,构建 pRSET IGF重组质粒 ,转化入大肠杆菌BL2 1(DE3)进行表达。带有重组质粒 pRSET IGF的大肠杆菌BL2 1(DE3)经IPTG诱导表达后 ,SDS PAGE分析表明 :可表达出相对分子质量 780 0 0的蛋白 ,重组蛋白以非融合、可溶性形式表达 ,表达量占菌体总蛋白量的 10 %~ 2 0 % ,Western印记表明重组蛋白具有hIGF 1的抗原活性。构建的 pRSET IGF重组质粒成功地在大肠杆菌BL2 1(DE3)中高效可溶性表达 。

主 题 词:胰岛素样生长因子-1 克隆 原核表达  大肠杆菌 细胞调控因子 基因工程 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.3969/j.issn.1005-8915.2001.04.002

馆 藏 号:203234854...

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