鸭疫里默氏杆菌PCR快速检测方法的建立

作     者：季权安 刘燕 肖琛闻 韦强 霍翠梅 鲍国连 JI Quan-an;LIU Yan;XIAO Chen-wen;WEI Qiang;HUO Cui-mei;BAO Guo-lian

作者机构：浙江省农业科学院畜牧兽医研究所浙江杭州310021 山东省济宁市畜牧兽医局山东济宁272000 

基　　金：浙江省"三农五方"科技协作计划项目"鸭主要疫病防控关键技术集成与推广应用"(SN200803) 

出 版 物：《浙江农业学报》 (Acta Agriculturae Zhejiangensis)

年 卷 期：2012年第24卷第3期

页      码：388-391页

摘      要：鸭疫里默氏杆菌病对养鸭业危害严重,传统及常规检测方法均有不足,因此有必要建立起一种更加快速简捷、敏感实用的菌落PCR法。根据GenBank公布的鸭疫里默氏杆菌ATCC株OMPA基因序列,在基因保守区设计特异性引物,直接挑取单菌落作为模板,从分离鉴定的1,2,10,11型15株菌及1,2,10,11型4株参考菌株中均能扩增出大小为670 bp的特异性核酸片段,而对照的大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌的扩增结果均为阴性;将培养菌用TE作10倍梯度稀释,最低检出限量为80个鸭疫里默氏杆菌;建立的菌落PCR与常规PCR法比较,两种方法均能扩增出相同的特异性条带。结果表明,菌落PCR法具有较好的特异性和敏感性,与常规PCR法结果完全一致,且更加快速简捷,在临床应用上具有更好的实用价值。

主 题 词：菌落PCR 常规PCR 鸭疫里默氏杆菌 OMPA基因 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-1524.2012.03.006

馆 藏 号：203235138...