Naa10基因RNA干扰慢病毒载体的构建及其对口腔鳞癌细胞生长的影响

作     者：杨洋 郑军 徐江 顾永清 黄瑾 王丹妮 朱茂祥 曾妍 YANG Yang ZHENG Jun XU Jiang GU Yong - qing HUANG Jin WANG Dan - ni ZHUMao-xiang ZENG Yan

作者机构：新疆石河子大学新疆地方与民族高发病教育部重点实验室/医学院生化教研室新疆石河子832000 新疆石河子大学医学院第一附属医院口腔科新疆石河子832000 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 

基　　金：国家自然科学基金(编号:81560473 81560442 U1603117 31470827) 兵团基金资助项目(编号:2014BB021 2015AD003) 

出 版 物：《口腔医学研究》 (Journal of Oral Science Research)

年 卷 期：2017年第33卷第7期

页      码：707-711页

摘      要：目的:构建人N-α-乙酰基转移酶10(N-α-acetyltransferase 10,Naa10)基因有效的慢病毒RNAi载体并转染人口腔鳞癌细胞SCC-15,研究其对口腔鳞癌细胞生长的影响。方法:根据人Naa10基因mRNA序列设计合成3个siRNA片段,转染人口腔鳞癌SCC-15细胞株并进行验证,将最有效的干扰序列克隆至pLV-shRNA载体上,测序正确后进行包装,测定病毒颗粒滴度后,将慢病毒感染SCC-15细胞以测定Naa10的表达情况,并通过生长曲线研究干扰Naa10对SCC-15细胞生长的影响。结果:3个靶点的siNaa10均能有效抑制Naa10基因的表达,其中2号靶点最为有效(P<0.005);重组RNAi质粒pLV-shNaa10经测序证实构建成功,pLV-shNaa10可在293T细胞中成功包装;测定病毒颗粒LV-shNaa10、LV-NC滴度分别为1.2×10~9 TU/mL和1.0×10~9 TU/mL;SCC-15细胞感染LV-shNaa10后,Naa10蛋白表达明显降低(P<0.005);干扰Naa10可促进人口腔鳞癌细胞SCC-15的生长。结论:成功构建了Naa10shRNA慢病毒表达载体,感染人口腔鳞癌细胞SCC-15后,有效抑制了内源性Naa10基因的表达,干扰Naa10可促进SCC-15细胞的生长。

主 题 词：N-α-乙酰基转移酶10 慢病毒 RNA干扰 口腔鳞癌 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.13701/j.cnki.kqyxyj.2017.07.005

馆 藏 号：203236975...