SiRNA抑制小鼠皮肤成纤维细胞TGF-β1基因表达的实验研究

作     者：任润健 方磊 贾传龙 赵虎 陈亮 秦登科 周慧敏 毕波 Ren Runjian Fang Lei Jia Chuanlong Zhao Hu Chert Liang Qin Dengke Zhou Huimin Bi Bo[1.]

作者机构：复旦大学附属华东医院检验科上海200040 复旦大学附属华东医院整形外科上海200040 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81301642) 

出 版 物：《老年医学与保健》 (Geriatrics & Health Care)

年 卷 期：2017年第23卷第3期

页      码：193-197页

摘      要：目的设计、合成及筛选光老化相关基因—转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)小分子干扰RNA(siRNA),了解基因调控效果,用以探索皮肤抗衰老基因治疗可能的新途径。方法应用RNA设计软件,设计并合成针对小鼠TGF-β1 mRNA的3对21核苷酸siRNA,转染小鼠成纤维细胞,检测转染效率及细胞活性;分别在基因和蛋白水平检测TGF-β1表达。结果 TGF-β1基因siRNA工作浓度为150nmol/L,Lipofectamine2000脂质体4μL/孔(24孔板)时转染率最高(84.0%。综合考虑转染率与细胞活性,选用0.5μL/孔(转染率为72.4%。与对照组相比,转染TGF-β1 siRNA的小鼠皮肤成纤维细胞TGF-β1表达下调,其差异有统计学意义(P<0.05),以siRNA-S1最显著,基因水平抑制率达96.9%,蛋白水平抑制率达62.0%。结论:TGF-β1siRNA转染小鼠成纤维细胞最佳条件是Lipofectamine2000脂质体0.5μL/孔,siRNA-S1有效抑制TGF-β1蛋白表达时间可达72h。

主 题 词：TGF-β1 小干扰RNA 小鼠 皮肤成纤维细胞 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1010[医学-医学技术类] 100215[100215] 10[医学] 100206[100206] 

馆 藏 号：203236984...