番茄环纹斑点病毒(TZSV)实时荧光定量PCR检测方法的建立

作     者：徐弢 郑雪 张晓林 陈永对 穆野 陈勇 郑宽瑜 赵立华 刘小烛 张洁 Xu Tao;Zheng Xue;Zhang Xiaolin;Chen Yongdui;Mu Ye;Chen Yong;Zheng Kuanyu;Zhao Lihua;Liu Xiaozhu;Zhang Jie

作者机构：西南林业大学生命科学学院云南昆明650224 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所/云南省农业生物技术重点实验室/农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室云南昆明650223 福建省农业科学院植物保护研究所福建福州350003 

基　　金：国家自然科学基金项目(31360430 31460461 31560499) 云南省科技计划项目面上项目(2016FB063) 云南省优势特色重点学科生物学一级学科建设项目(50097505) 云南省中青年学术技术带头人后备人才项目(2015HB081) 福建省农科院青年英才项目(YC2016-5) 

出 版 物：《山东农业科学》 (Shandong Agricultural Sciences)

年 卷 期：2017年第49卷第7期

页      码：139-144页

摘      要：本研究根据番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)保守N基因(Gen Bank登录号:13YV639)设计一对特异性引物,通过优化反应条件和反应体系,构建了TZSV的SYBR Green RT-qPCR检测方法。该方法稳定可靠,组内和组间的变异系数都小于2%;标准曲线的斜率和相关系数分别为-3.39和0.996,扩增效率为97.44%;最低能检测到1.07×10~4copies/μL的阳性质粒,灵敏度为常规PCR的1 000倍。同时利用构建的RT-qPCR方法检测TSWV、TNSa V、PCSV和TZSV四种病毒,只有TZSV有特异扩增曲线,表明该方法特异性良好。本研究构建的RT-qPCR方法能够为TZSV的早期预警与动态监测提供可靠的技术支撑。

主 题 词：番茄环纹斑点病毒 实时荧光定量PCR 检测方法 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0904[农学-动物医学类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.14083/j.issn.1001-4942.2017.07.030

馆 藏 号：203237048...