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成纤维细胞生长因子19转录活性及上游结合元件分析

成纤维细胞生长因子19转录活性及上游结合元件分析

作     者:徐宜兰 陈淑芹 张菁 白宁宁 方启晨 

作者机构:上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科、上海市糖尿病研究所、上海市糖尿病重点实验室、上海市糖尿病临床医学中心200233 

基  金:上海市自然科学基金资助项目(15ZR1431700) 

出 版 物:《医学研究杂志》 (Journal of Medical Research)

年 卷 期:2017年第46卷第6期

页      码:75-79页

摘      要:目的构建FGF19基因启动子区荧光素酶报告基因质粒,并研究分析其启动子区的转录活性和结合元件。方法设计特异性引物PCR扩增基因组DNA,得到长为3323bp的FGF19基因启动子区片段,将此PCR产物插入荧光素酶报告基因载体p GL3-Basic Vector,获得全长为3323bp的FGF19基因启动子区荧光素酶报告基因质粒。在此基础上设计特异性引物,构建5 端系列缺失荧光素酶报告基因质粒。通过瞬时转染实验检测所构建质粒的相对荧光素酶活性,分析不同启动子区片段对FGF19基因转录活性的影响,并用软件预测影响启动子转录活性的关键转录因子。结果构建了7个FGF19基因启动子区荧光素酶报告基因质粒,经双酶切和测序验证均正确。瞬时转染及荧光素酶报告基因分析实验发现启动子区-2351^-2316是调控FGF19启动子转录活性的重要序列,且在线软件预测该序列存在潜在的转录因子位点。结论 FGF19基因启动子区-2351^-2316是调控其启动子转录活性的关键位置。

主 题 词:FGF19 转录调控 启动子 质粒构建 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

D O I:10.11969/j.issn.1673-548X.2017.06.020

馆 藏 号:203237253...

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