靶向性发夹状RNA对卵巢癌SKOV3细胞H-ras基因表达的影响

作     者：王萍玲 胡丽娜 孙袁 梁雪雯 

作者机构：贵阳市妇幼保健院妇科550003 四川大学华西二院妇产科成都610041 

出 版 物：《贵州医药》 (Guizhou Medical Journal)

年 卷 期：2006年第30卷第7期

页      码：584-587页

摘      要：目的 运用构建的小发夹状RNA重组质粒pshRNA／H—ras，研究其对卵巢癌SK—OV3细胞株内源H-ras基因的抑制作用。方法 应用基因克隆技术，设计含21bp H—ras基因编码序列片段及中间以4～5个bp间隔的反向重复序列，克隆至转录载体pTZU6＋1上并行序列分析。转染重组质粒pshRNA／H—ras至SKOV3细胞中，分别采用RT-PCR、Western blot检测细胞内H-rasmRNA和蛋白表达的变化。结果 成功构建发夹状RNA载体，经DNA序列鉴定为正确的目的序列。RT-PCR和Western blot结果表明，重组质粒pshRNA／H—ras1和pshRNA／H—ras2均能在基因转录水平和蛋白表达水平上明显抑制SKOV3细胞内源H—ras蛋白的表达，抑制率达67％以上。结论 重组质粒pshRNA／H—ras可显著抑制SKOV3细胞内源H-ras基因mRNA的转录和相应蛋白质的表达，为进一步研究H-ras基因在卵巢癌细胞异常增殖中的作用打下基础。

主 题 词：RNA干扰 基因H—ras 表达 卵巢肿瘤 细胞株 SKOV3 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-744X.2006.07.003

馆 藏 号：203239715...