直接PCR法检测血液中伊氏锥虫感染

作     者：陆绍红 陈睿 楼涤 张乐 张雪娟 LU Shao-Hong;CHEN Rui;LOU Di;ZHANG Le;ZHANG Xue-Juan

作者机构：浙江省医学科学院寄生虫病研究所杭州310013 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所杭州310021 

基　　金：人事部留学人员科技活动项目资助(A30401E) 

出 版 物：《寄生虫与医学昆虫学报》 (Acta Parasitologica et Medica Entomologica Sinica)

年 卷 期：2006年第13卷第4期

页      码：204-207页

摘      要：为建立伊氏锥虫动基体DNA(KinetoplastDNA,kDNA)的PCR扩增技术,血液直接PCR法检测伊氏锥虫的感染,本文以伊氏锥虫kDNA片段为靶扩增DNA设计引物,确定最适PCR反应条件,建立kDNA片段的PCR扩增技术,应用直接扩增缓冲液(Ampdirect)从感染小鼠的滤纸血标本直接PCR检测伊氏锥虫。结果发现,PCR扩增伊氏锥虫kDNA片段分子量为364bp,能检测的最小DNA量是0·06pg,与布氏锥虫、活动锥虫没有交叉反应。应用直接扩增缓冲液不需进行样本的DNA抽提,直接PCR能检测感染小鼠的早期滤纸血样本,敏感性高于镜检法。本实验建立的直接PCR法检测伊氏锥虫具有较高的敏感性和特异性,方法快捷,可进一步应用于伊氏锥虫病的早期诊断以及现场调查。

主 题 词：伊氏锥虫 直接PCR 动基体DNA(kDNA) 血液 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1010[医学-医学技术类] 100215[100215] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-0507.2006.04.003

馆 藏 号：203239841...