鸡传染性支气管炎病毒分离株核衣壳基因克隆、序列分析和真核表达

作     者：焦红梅 潘志明 孟松树 田华荣 耿士忠 焦新安 JIAO Hong-mei;PAN Zhi-ming;MENG Song-shu;TIAN Hua-rong;GENG Shi-zhong;JIAO Xin-an

作者机构：扬州大学人兽共患病和免疫学研究室江苏扬州225009 

基　　金：国家自然科学基金(30425031) 江苏省重点实验室开放课题(02738960314) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2007年第29卷第3期

页      码：185-189页

摘      要：根据GenBank公开序列自行设计一对引物,采用RT-PCR扩增出鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)W和C9001分离株完整的核衣壳(N)基因,并将其克隆至pMD18-T载体进行核苷酸序列测定和分析。结果表明,扩增的2个IBV分离株核衣壳基因片段长度均为1230bp,编码409个氨基酸,彼此间核苷酸和氨基酸同源性分别为88.0%和89.5%,与GenBank中有代表性的参考毒株相应基因核苷酸和氨基酸序列比较显示,W株核苷酸序列与GenBank中的广东分离株(AY646283)同源性最高,为94.1%,氨基酸序列同源性为94.6%;与国内部分毒株核苷酸序列同源性在86.1%～88.0%之间,氨基酸序列同源性在88.0%～90.7%之间;C9001株与国内部分毒株核苷酸序列同源性在86.4%～99.8%之间,氨基酸序列同源性在88.0%～99.8%之间。从核衣壳基因编码的氨基酸序列的系统进化树可见,W株与C9001株处于不同的进化分枝,亲缘关系较远。同时将核衣壳基因构建于真核表达质粒pVAX1中,用脂质体法将重组质粒转染入COS-7细胞中,间接免疫荧光检测出核衣壳蛋白的体外表达。研究结果为进一步研究IBV核衣壳蛋白的结构与功能以及基因工程疫苗的研制奠定了基础。

主 题 词：鸡传染性支气管炎病毒 核衣壳基因 克隆 序列分析 真核表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 090601[090601] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.2007.03.007

馆 藏 号：203239891...