猪瘟病毒p80基因丝氨酸蛋白酶功能区的原核表达及小鼠免疫试验

作     者：鲁絮 许信刚 张彦明 张淼涛 李少方 LU Xu;XU Xin-gang;ZHANG Yan-ming;ZHANG Miao-tao;LI Shao-fang

作者机构：中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046 西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100 

基　　金：农业部畜禽病毒学重点开放实验室资助课题 2005西北农林科技大学博士科研启动经费资助(编码01140507) 

出 版 物：《西北农业学报》 (Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica)

年 卷 期：2007年第16卷第6期

页      码：14-18页

摘      要：根据已发表的猪瘟病毒Alfort株的全基因组序列,设计2对引物以Shimen细胞毒株为材料,一步法提取总RNA,利用RT-PCR和套式PCR,成功扩增出p80全长基因,包括丝氨酸蛋白酶以及NTPase/RNA解旋酶功能区,大小约为2.0kb。将p80基因中的丝氨酸蛋白酶基因克隆到原核表达载体pET-32a中,获得重组质粒pET-p80。将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)中,IPTG诱导表达得到分子量约为43ku的目的蛋白,与理论大小相符。将菌体蛋白经Ni柱纯化,获得纯化重组p80蛋白,Western blot检测表明,表达的目的蛋白能与CSFV阳性血清发生反应。用纯化的p80蛋白免疫Bal b/c小鼠,成功制备了抗p80蛋白的抗血清。

主 题 词：猪瘟病毒 p80基因 原核表达 免疫 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-1389.2007.06.003

馆 藏 号：203240103...