siRNA沉默G6PD表达对人皮肤黑色素瘤细胞生长及凋亡的影响

作     者：朱月春 吕会茹 李丹怡 童淑芬 ZHU Yue-Chun;L(U) Hui-Ru;LI Dan-Yi;TONG Shu-Fen

作者机构：昆明医学院生物化学教研室昆明650031 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30460049) 

出 版 物：《生物化学与生物物理进展》 (Progress In Biochemistry and Biophysics)

年 卷 期：2008年第35卷第3期

页      码：327-334页

摘      要：研究表明,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)与肿瘤的发生、发展、临床表型及治疗和预后有关.为阐明G6PD与肿瘤的关系及其机理,针对人G6PD基因设计3条siRNA和一条无关序列,再据每一序列,合成两条互补并含siRNA正反义链的DNA,退火后与含GFP的载体pRNAT-U6.2/Lenti连接,转染人皮肤黑色素瘤A375细胞,Real-timePCR筛选有效的一条siRNA,经病毒颗粒包装和病毒生产并感染A375细胞,G418筛选后,挑取单个阳性克隆放大培养,Western blotting检测siRNA干扰G6PD效率为88.83%,构建成G6PD缺陷型A375稳转细胞(A375-G6PD!).与野生型A375细胞(A375-WT)比较,A375-G6PD!的G6PD活性仅为21.53%,细胞倍增时间延长,增殖被抑制,克隆形成率降低25%(P0.05),提示,G6PD缺陷可能通过下调P53蛋白表达和上调Caspase-3的表达,抑制G2/M期向G0/G1期转换的进程,促进A375的凋亡,机理有待于进一步探讨.

主 题 词：siRNA干扰 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 人皮肤黑色素瘤 稳转细胞株 细胞周期 P53 Caspase-3 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1000-3282.2008.03.013

馆 藏 号：203240194...