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二温式PCR在特异短核酸探针合成中的应用

二温式PCR在特异短核酸探针合成中的应用

作     者:董倩 黄国强 叶冰莹 陈由强 陈如凯 DONG Qian;HUANG Guo-qiang;YE Bing-ying;CHEN You-qiang;CHEN Ru-kai

作者机构:福建师范大学福清分校生物与化学工程系福建福清350300 福建农林大学甘蔗综合研究所福建福州350002 福建师范大学生命科学学院 农业部甘蔗生理生态与遗传改良重点开放实验室福建福州350002 

基  金:农业部“948”重大项目资助(2006-G37) 国家公益性行业(农业)科研专项项目(nyhyzx07-019) 国家“863”计划项目(2007AA100701) 

出 版 物:《花生学报》 (Journal of Peanut Science)

年 卷 期:2008年第37卷第3期

页      码:5-10页

摘      要:经基因库序列比对确定花生白藜芦醇合酶基因(RS)中的特异序列(长度约108 bp)。以此为模板设计分别含有SalI和SacI酶切位点的一对上、下游引物,并应用二温式PCR扩增得到该特异短片段。将该特异片段正向连接到pBlueskriptIIKS(+)的多克隆位点上,利用T7 RNA聚合酶在体外转录合成地高辛标记的反义特异短核酸探针。该特异短核酸探针的合成为后续RS基因在花生组织器官中表达的RNA原位杂交研究打下了基础。

主 题 词:二温式PCR 花生 白藜芦醇合酶 核酸探针 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.3969/j.issn.1002-4093.2008.03.002

馆 藏 号:203240343...

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