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PRRSV NSP2基因在重组杆状病毒中的表达与鉴定

PRRSV NSP2基因在重组杆状病毒中的表达与鉴定

作     者:宋艳华 王海燕 李文良 李军星 李玉峰 王先炜 姜平 SONG Yan-hua;WANG Hai-yan;LI Wen-liang;LI Jun-xing;LI Yu-feng;WANG Xian-wei;JIANG Ping

作者机构:南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095 

基  金:国家自然科学基金(30871868) 国家科技支撑计划(2007BAD86B02-3 2006BAD06A04) 江苏省科技攻关项目(BE2007342) 教育部博士点基金项目(20060307007) 

出 版 物:《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期:2009年第31卷第7期

页      码:509-512页

摘      要:为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)非结构蛋白2(NSP2)之间的差异和生物学特性,本研究根据PRRSV、S1、SY0608株NSP2基因序列保守区设计引物,通过RT-PCR扩增出两毒株的NSP2基因,克隆到pFastBacTMHTB杆状病毒载体中,将筛选的阳性重组载体pF-S1-NSP2和pF-SY-NSP2,分别转化至含有杆状病毒穿梭载体的DH10Bac感受态大肠杆菌中,经蓝白菌落筛选和PCR鉴定,获得重组表达载体rBac-S1-NSP2和rBac-SY-NSP2。在脂质体介导下转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rAc-S1-NSP2和rAc-SY-NSP2,Westernblot和间接免疫荧光实验结果表明,本研究成功构建了表达PRRSVS1和SY0608株NSP2蛋白的重组杆状病毒,表达的蛋白与自然感染PRRSV的猪血清均具有良好的反应原性,为进一步研究NSP2蛋白的功能及生物学和免疫学特性奠定了基础。

主 题 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP2 杆状病毒 

学科分类:090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

馆 藏 号:203240786...

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