大肠杆菌O157:H7 sRNA基因E40缺失突变株的构建

作     者：王刚 宋兰 马延 周围 张德礼 岳俊杰 梁龙 WANG Gang;SONG Lan;MA Yon;ZHOU Wei;ZHANG De-Li;YUE Jun-Jie;LIANG Long

作者机构：军事医学科学院生物工程研究所北京100071 西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 

基　　金：国家自然科学基金(30572278) 

出 版 物：《生物技术通讯》 (Letters in Biotechnology)

年 卷 期：2010年第21卷第2期

页      码：175-178页

摘      要：目的:利用Red系统构建肠出血性大肠杆菌O157:H7的sRNA基因E40缺失突变株。方法:选取本实验室预测并经过实验验证的sRNA基因,根据NCBI上相应的序列,设计2对引物分别扩增该sRNA基因的上下游分别长464和455bp的同源臂,经PCR扩增,构建到相应的载体,最后以构建好的含上下游同源臂和卡那霉素抗性基因的长约2500bp的线性片段作为打靶片段,在Red重组系统的作用下与sRNA基因E40的上下游同源区域发生同组,从而把sRNA基因从基因组上置换下来,之后利用质粒pCP20将FRT位点间的卡那霉素抗性基因消除。结果与结论:构建了出血性大肠杆菌O157:H7的sRNA基因E40的缺失突变株,为进一步研究sRNA基因在出血性大肠杆菌O157:H7生长及致病过程中所起的功能奠定了良好的基础。

主 题 词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 sRNA Red重组系统 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-0002.2010.02.007

馆 藏 号：203241044...