根结线虫雌虫ISSR-PCR反应体系的建立与优化

作     者：思彬彬 张学娟 张靠稳 Si Binbin;Zhang Xuejuan;Zhang Kaowen

作者机构：北方民族大学生物科学与工程学院宁夏银川750021 

基　　金：北方民族大学校级科研项目(2010Y045) 

出 版 物：《中国植保导刊》 (China Plant Protection)

年 卷 期：2014年第34卷第2期

页      码：18-21,26页

摘      要：以根结线虫雌虫DNA为基础,建立和优化稳定的ISSR-PCR反应体系。试验采用5因素、4水平的正交试验和单因子梯度优化相结合的方法。通过试验得到适用于根结线虫雌虫的25μL ISSR-PCR反应体系中各因素的最佳浓度分别为dNTPs 0.24 mmol/L、Mg2+2.1 mmol/L、Taq酶0.4 U、引物0.3μmol/L、DNA 140 ng。经引物UBC835、UBC857对根结线虫雌虫最佳ISSR-PCR反应体系验证。该反应体系稳定、可靠,正交结合单因子试验可以建立满足后续试验要求的ISSR-PCR体系。

主 题 词：根结线虫雌虫 ISSR-PCR 正交设计 单因子 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 071001[071001] 07[理学] 09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-6820.2014.02.005

馆 藏 号：203242859...