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脑心肌炎病毒(EMCV)RT-PCR检测方法的建立及初步应用

脑心肌炎病毒(EMCV)RT-PCR检测方法的建立及初步应用

作     者:王吉 付瑞 卫礼 李晓波 冯育芳 巩薇 王淑菁 岳秉飞 贺争鸣 WANG Ji;FU Rui;WEI Li;LI Xiao-bo;FENG Yu-fang;GONG Wei;WANG Shu-jing;YUE Bing-fei;HE Zheng-ming

作者机构:中国食品药品检定研究院、国家实验动物微生物、遗传检测中心北京100050 

基  金:实验动物新品种的种群建立与质量标准化研究(国家科技支撑计划项目:2011BAI15B01) 

出 版 物:《中国比较医学杂志》 (Chinese Journal of Comparative Medicine)

年 卷 期:2013年第23卷第7期

页      码:44-49页

摘      要:目的建立脑心肌炎病毒(EMCV)RT-PCR检测方法,应用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物EMCV的检测。方法根据已发表的EMCV VP1基因序列设计合成引物。建立RT-PCR方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行验证。用该方法检测62只长爪沙鼠、12只小鼠。结果建立的EMCV RT-PCR检测方法特异、敏感、稳定。以EMCV RNA逆转录产物为模板,所能检测RNA最小模板浓度为4.1 pg/μL,可检测病毒最小滴度为10-7mL-1。经RT-PCR检测,62只沙鼠均为阴性;12只小鼠中有1只EMCV核酸阳性,测序结果与GenBank中EMCV标准株核苷酸序列进行比对,其同源性为85%。结论建立的脑心肌炎病毒(EMCV)RT-PCR检测方法特异、敏感、稳定,可用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物EMCV的检测。

主 题 词:脑心肌炎病毒 反转录聚合酶链式反应 长爪沙鼠 小鼠 

学科分类:10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1671-7856.2013.07.011

馆 藏 号:203242867...

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