一种新型双重靶向性抗乳腺癌融合蛋白原核表达质粒的构建

作     者：顾丽 张君 丁海麦 李晓晶 苏燕 GU Li;ZHANG Jun;DING Haimai;LI Xiaojing;SU Yan

作者机构：包头医学院病原生物学教研室内蒙古包头014060 民航总医院检验科 包头医学院生物化学与分子生物学教研室 

基　　金：内蒙古自然科学基金(No.200711020913) 

出 版 物：《包头医学院学报》 (Journal of Baotou Medical College)

年 卷 期：2014年第30卷第1期

页      码：15-18页

摘      要：目的:利用基因重组技术,构建Del1-9-G129R-T3双重靶向性抗乳腺癌融合蛋白的原核表达质粒。方法:以质粒pET22b-G129R-G129R为模板,PCR扩增两端带有NdeI和BamHI识别序列的目的基因Del1-9-G129R-hPRL。根据T3的碱基序列,采用重叠延伸PCR技术人工设计合成三段引物,扩增两端带有BamHI和XhoI识别序列的T3目的基因片段。将纯化的Del1-9-G129R-hPRL、T3作为模板,利用前者的上游引物和后者的下游引物,PCR扩增带有NdeI和XhoI识别序列的融合基因Del1-9-G129R-T3,克隆到T载体,双酶切后插入pET22b(+)多克隆位点,构建原核表达载体pET22b-Del1-9-G129R-T3。经DNA测序正确后,将重组表达质粒转化原核表达菌BL21(DE3)。结果:质粒测序显示重组融合蛋白基因序列除两处同义突变外与GenBank中记载的碱基序列完全一致。结论:成功构建了融合蛋白Del1-9-G129R-T3基因原核表达质粒。

主 题 词：乳腺癌 人催乳素受体拮抗剂 肿瘤抑素 融合基因Del1-9-G129R-T3 质粒构建 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.16833/j.cnki.jbmc.2014.01.007

馆 藏 号：203242928...