云南省师宗县蓝舌病病毒的分离及鉴定

作     者：肖雷 孟锦昕 李楠 高林 何于雯 杨恒 胡骑 李华春 朱建波 XIAO Lei;MENG Jin-xin;LI Nan;GAO Lin;HE Yu-wen;YANG Heng;HU Qi;LI Hua-chun;ZHU Jian-bo

作者机构：云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室昆明650224 

基　　金：云南省应用基础研究面上项目(2010ZC226) 国家公益性行业项目(农业)专项(201303035) 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2014年第22卷第4期

页      码：1-6页

摘      要：为了解近年来云南省师宗县蓝舌病病毒流行情况，2012年在师宗县五龙乡建立了10头蓝舌病血清学阴性黄牛的监控动物群。从2012年5-10月，每周采血1次，11-12月，每月采血1次，采用C-ELISA进行血清学监测。8月开始动物血清学检测结果转阳性，至11月，监控动物全部转为阳性。用转阳前1周、转阳本周、转阳后2-13周的经处理的红细胞静脉接种鸡胚，收获鸡胚肝脏，用PBS悬浮捣碎的鸡胚肝脏，上清接种于C6/36细胞一代、BHK-21三代后，出现细胞病变（cytopathic effect, CPE）。采用RT-PCR方法，针对蓝舌病较为保守的血清型群特异片段VP7设计了2对引物，扩增其相应片段。结果显示，共分离到86份疑似分离物，其中67份疑似分离物细胞培养液上清经RT-PCR扩增，均扩增出1156 bp片段，初步确认为蓝舌病病毒。采用国际24个蓝舌病标准毒及24个标准阳性血清对86份疑似分离物及其对应血清进行细胞微量中和试验，67份毒株为蓝舌病病毒，与RT-PCR结果一致。通过对2份经中和试验定型为BTV-1、BTV-16分离株的VP2基因测序分析发现，BTV-1株序列与同型Y863（登录号：KC879616）参考毒株的同源性为92%，BTV-16株序列与登录号为AB686221的毒株同源性为99%。结果表明共分离到67株蓝舌病毒株，分离株主要为BTV-1、BTV-9、BTV-16三个血清型。

主 题 词：蓝舌病病毒 分离 鉴定 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203243228...