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应用Gibson Assembly法构建人果蝇zeste基因增强子同源物2基因过表达慢病毒载体

应用Gibson Assembly法构建人果蝇zeste基因增强子同源物2基因过表达慢病毒载体

作     者:朱进 单玉喜 薛波新 阳东荣 

作者机构:苏州大学附属第二医院泌尿外科215004 

基  金:国家自然科学基金资助项目(81472776) 教育部博士学科点专项科研基金资助项目(20133201110016) 

出 版 物:《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期:2015年第32卷第10期

页      码:2552-2552页

摘      要:果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)是组蛋白甲基转移酶。研究表明EZH2在前列腺癌中起关键作用[1]。我们应用GibsonAssembly法构建了pWPI-HA-EZH2慢病毒载体。 一、材料与方法 ***载体PacI和PmeI双酶切后,削平黏性末端,去磷酸化。 2.以pCMV-HA-EZH2质粒为模板,设计引物,序列:上游:CTCAGGAATTTCGACATTTTAAA佃IAATGGCATACCCATACGAT-GTTCCA,下游:TCCTGCAGCCCGTAGTTTTCAAGGGATITCCAT-TTCTCTTT。聚合酶链反应(PCR)扩增目的片段,回收产物。

主 题 词:慢病毒载体 增强子 e基因 基因过表达 应用 果蝇 组蛋白甲基转移酶 聚合酶链反应 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071007[071007] 

D O I:10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2015.10.076

馆 藏 号:203243657...

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