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水稻重复序列RRD3:植物启动子及其在RNA干涉中的应用(英文)

水稻重复序列RRD3:植物启动子及其在RNA干涉中的应用(英文)

作     者:仲健 王宏斌 张党权 刘兵 王金发 Jian Zhong;Hongbin Wang;Dangquan Zhang;Bing Liu;Jinfa Wang

作者机构:昂赛细胞基因有限公司细胞产品国家工程研究中心天津300457 中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室和基因工程教育部重点实验室广州510275 

基  金:This work was supported by the National Natural Science Foundation of China (No. 30370809) 

出 版 物:《Journal of Genetics and Genomics》 (遗传学报(英文版))

年 卷 期:2007年第34卷第3期

页      码:258-266页

摘      要:RRD3是通过复性动力学从水稻基因组中克隆到的一个中度重复序列,序列分析揭示其含有多个保守的启动子元件,包括4个TATA-boxes和CAAT-box,在Escherichia coli及哺乳动物表达系统中均表现出启动子活性。我们将RRD3片段插入到植物启动子捕获载体pCAMBIA1391Z中,检测RRD3片段是否在植物中也有启动子活性,转基因烟草再生植株和水稻愈伤组织均显示了gusA基因的表达,表明其在单子叶和双子叶植物中均可行使启动子功能。基于RRD3的双效启动子特性,我们设计并构建了植物通用双元RNAi载体pCRiRRD3,适于进行植物的RNA干涉实验研究。我们在植物RNAi载体pCRiRRD3的内含子(200bp)的上下游分别引入了2个多克隆位点,方便了正义及反义片段的接入。转基因烟草植株的GUS组织化学及荧光定量分析表明该载体可有效进行RNA沉默。这些研究结果表明,利用单子叶和双子叶双效活性的RRD3启动子而构建的植物RNAi载体,可同时有效地应用于大部分单子叶和双子叶植物的RNAi实验及研究。

主 题 词:RRD3 启动子 GUS组织化学分析 GUS荧光定量分析 RNA干涉 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 1001[医学-基础医学] 09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

核心收录:

D O I:10.1016/S1673-8527(07)60027-7

馆 藏 号:203246152...

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