河北省马铃薯Y病毒株系分子鉴定及其RT-PCR检测

作     者：吴志明 时星 谢晓亮 温春秀 张庆良 WU Zhi-ming;Shi Xing;XIE Xiao-liang;WEN Chun-xiu;ZHANG Qing-ling

作者机构：河北省农林科学院经济作物研究所河北石家庄050051 河北省高碑店农业局河北保定074000 河北科润农业技术有限公司河北石家庄050051 

基　　金：河北省科技攻关项目(04225505) 

出 版 物：《河北农业大学学报》 (Journal of Hebei Agricultural University)

年 卷 期：2005年第28卷第3期

页      码：54-59页

摘      要：根据马铃薯Y病毒(PotatovirusY,PVY)的外壳蛋白基因序列,设计合成了一对寡核苷酸引物,从感染PVY的马铃薯田间病叶组织中提取出病毒的RNA,进行cDNA合成及PCR扩增,得到一条长度约800bp的特异PCR扩增产物,与理论设计的基因片段大小一致,本试验建立了快速、灵敏、简便的PVY检测的方法。将RT-PCR扩增产物克隆到质粒pGEM-T上,并进行了序列分析。结果表明,克隆的cDNA片段由801个核苷酸组成,编码267个氨基酸组成的理论分子量为29kD蛋白,与PVY外壳蛋白的大小一致,与基因库登记的代表性株系相比,它们之间的核苷酸序列同源性为89 6%～98 8%,氨基酸序列的同源性为93 3%～98 5%,说明PVYCP基因具有高度的保守性(记为PVY-HBEI),与国内报道的PVY-CHU、PVY-ZHJ和PVY-ZHOU株系的氨基酸序列同源性分别为96 6%、98 5%和97 8%,与PVYN和PVYO株系的氨基酸序列同源性分别为93 6%和97 8%,从分子水平上确定PVY-HBEI归属于普通株系(PVYO株系)。

主 题 词：马铃薯Y病毒 反转录-聚合酶链式反应 病毒检测 外壳蛋白基因(CP) 序列分析 株系鉴定 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-1573.2005.03.014

馆 藏 号：203247758...