CⅡTA锤头状核酶抑制Jukart细胞MHCⅡ类抗原的表达

作     者：郭荣 邹萍 宋永平 马军 陆华中 曹谊林 童允洁 GUO Rong;ZOU Ping;SONG Yong-ping;MA Jun;LU Hua-zhong;CAO Yi-lin;TONG Yun-jie

作者机构：华中科技大学附属协和医院血液病研究所武汉430022 河南省肿瘤医院血液病研究所 哈尔滨市第一医院血液病研究所 上海市血液中心血液工程研究室 上海第二医科大学组织工程重点实验室 

基　　金：上海市科技发展基金资助项目 (0 14 3nm0 68) 上海市科技发展基金 /重大项目子课题资助项目 (0 0DJ14 0 0 1 8) 

出 版 物：《中华儿科杂志》 (Chinese Journal of Pediatrics)

年 卷 期：2003年第41卷第12期

页      码：925-928页

摘      要：目的　针对同种异体细胞移植的免疫反应主要是由主要组织相容性复合物Ⅱ (majorhistocompatibilitycomplex ,MHC Ⅱ ,人类中亦称HLA Ⅱ )类抗原介导 ,而MHCⅡ类分子转录激活因子 (MHCclassⅡtransactivator ,CⅡTA)对MHCⅡ分子的表达起严格且专一性的调控作用 ,拟通过抗CⅡTA锤头状核酶 (ribozyme,Rz)抑制细胞表面MHCⅡ分子的表达。 方法　设计并合成针对人类CⅡTA基因第 134、2 18、4 6 4位点的一组核酶 ,分别命名为Rz134、Rz2 18、Rz4 6 4。通过体外制备和活性鉴定 ,筛选出活性较高的核酶———Rz4 6 4。将Rz4 6 4克隆到含有核糖体内进入位点及增强型绿色荧光蛋白的表达载体 (internalribosomeentrysite enhancedgreenfluorescentprotein ,pIRES2 EGFP) ,简称为 pRz4 6 4 ,并稳定转染Jukart细胞株 (pRz4 6 4 J) ,流式细胞术检测经典的MHCⅡ (HLA DR、DP、DQ)抗原表达 ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测CⅡTAmRNA水平。结果　pRz4 6 4 J与无关核酶组比较 ,HLA DR、DP、DQ抗原诱导型表达分别降低了 73 2 7%、88 93%、5 8 82 % ;同时CⅡTA的诱导性mRNA含量明显减少 (P <0 0 1)。结论　抗CⅡTA锤头状核酶可抑制CⅡ ATmRNA的表达 ,从而阻止其调控的相应基因———MHCⅡ分子的表达 ,为进一步探讨免疫?

主 题 词：CⅡTA锤头状核酶 抑制 JukaIt细胞 MHCⅡ类抗原 表达 免疫反应 种异体细胞移植 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.0578-1310.2003.12.115

馆 藏 号：203250428...