miR-205慢病毒表达载体的构建及其对乳腺癌细胞作用的初步研究

作     者：范楚苓 张萍 孙彩虹 钱晨 戚博 赵茹 肖荣琴 刘亚坤 李菲菲 

作者机构：安徽医科大学基础医学院合肥230032 皖西卫生职业学院六安237005 

基　　金：国家自然科学基金(编号:81302319) 安徽省自然科学基金(编号:1308085MH121) 国家级大学生创新创业训练计划项目(编号:201510366013) 

出 版 物：《安徽医科大学学报》 (Acta Universitatis Medicinalis Anhui)

年 卷 期：2017年第52卷第8期

页      码：1099-1104页

摘      要：目的构建micoRNA-205(miR-205)慢病毒表达载体,感染乳腺癌细胞MB231,建立稳定表达miR-205的MB231细胞株,观察其增殖能力的变化。方法酶切慢病毒载体GV369,设计并合成miR-205引物,通过PCR扩增目的基因连接到慢病毒载体上。对重组质粒双酶切鉴定,进行慢病毒hsa-miR-205的包装和滴度测定。用构建好的慢病毒感染MB231细胞,定量PCR检测细胞中miR-205表达水平的变化,MTT和划痕实验观察过表达miR-205后MB231细胞增殖和迁移能力的变化。结果测序显示,目的基因连接慢病毒载体成功。慢病毒稳定感染了MB231,定量PCR结果显示,感染hsa-miR-205的MB231中miR-205表达明显提高,MTT和划痕实验结果显示感染后MB231的细胞增殖和迁移能力受到抑制。结论成功构建了miR-205慢病毒表达载体,并建立了稳定表达miR-205的细胞株MB231,显示其可能负调控乳腺癌细胞的恶性生物学行为,为后期进一步研究miR-205的功能和机制奠定了基础。

主 题 词：miR-205 慢病毒 乳腺癌 细胞增殖 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100104[100104] 10[医学] 

D　O　I：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2017.08.001

馆 藏 号：203254208...