海洋金属蛋白酶MP仿生亲和材料纯化条件的优化

作     者：杨娟 李尚勇 马子宾 刘均忠 郝建华 王跃军 孙谧 YANG Juan;LI Shang-yong;MA Zi-bin;LIU Jun-zhong;HAO Jian-hua;WANG Yue-jun;SUN Mi

作者机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所海洋国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室山东青岛266071 上海海洋大学食品学院上海201306 

基　　金：NSFC-山东联合资助海洋研究中心项目(U1406402-5) 国际科技合作与交流专项(2014DFG30890) 国家实验室-鳌山科技计划(2015ASKJ02-06) 国家自然科学基金(41376175) 国家863计划(2014AA093516) 

出 版 物：《食品工业科技》 (Science and Technology of Food Industry)

年 卷 期：2017年第38卷第15期

页      码：146-152页

摘      要：目的:建立一种高效的海洋金属蛋白酶MP仿生亲和纯化方法。方法:采用硼酸仿生亲和材料,利用单因素实验,Plackett-Burman实验设计、Box-Behnken实验等响应面优化法,对纯化条件进行优化,利用SDS-PAGE及HPLC分析纯化后样品纯度。结果:利用单因素法和响应面法对纯化条件进行优化和分析,获得硼酸琼脂糖凝胶亲和柱的最佳纯化条件为:粗酶液浓度在100 mg/m L,上样缓冲液为p H8.6的甘氨酸-氢氧化钠,上样速度1 m L/min,洗脱缓冲液为p H5.2的磷酸氢二钠-柠檬酸,洗脱速度2 m L/min,洗脱缓冲液加入75 mmol/L的甘露醇时纯化效果最好,纯化效率提高了11倍,纯化后的样品纯度达到98.8%。

主 题 词：金属蛋白酶MP 亲和层析 纯化 

学科分类：0832[0832] 08[工学] 083201[083201] 

D　O　I：10.13386/j.issn1002-0306.2017.13.028

馆 藏 号：203255022...