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蛇毒纤溶酶ALF基因在大肠杆菌中的表达

蛇毒纤溶酶ALF基因在大肠杆菌中的表达

作     者:张守涛 史婧 李楠 郭蔼光 ZHANG Shou-tao;SHI Jing;LI Nan;GUO Ai-guang

作者机构:西北农林科技大学农业分子生物学陕西省重点实验室陕西杨凌712100 

出 版 物:《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 (Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition))

年 卷 期:2006年第34卷第12期

页      码:21-24页

摘      要:根据蛇毒纤溶酶(A lfim eprase,ALF)氨基酸序列和大肠杆菌密码子偏爱性,设计了14条单链DNA,采用重叠延伸PCR方法人工合成了ALF基因编码区。通过克隆使其分别连接在融合标签N usA,T h ioredox-in,Skp,H is T ag和信号肽pe lB的C端,构建成了多种ALF表达载体p43-A lf,p25-A lf,p32-A lf,p15-A lf和pSkp-A lf,转化大肠杆菌后进行了诱导表达,并对表达产物进行了SDD-PAGE分析。实验结果表明,合成的ALF基因长度为603 bp;构建的表达载体在大肠杆菌中均获得了很好的表达,其中pSkp-A lf表达量最高,目的蛋白含量高达菌体总蛋白的45%。

主 题 词:蛇毒纤溶酶 循环延伸PCR 基因表达 Skp 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:1671-9387.2006.12.005

馆 藏 号:203255168...

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