羊源类鼻疽伯克霍尔德菌BPSS1512基因克隆、原核表达及其蛋白的生物信息学分析

作     者：曹瑞勇 聂鑫 李宝宝 张振兴 黄海峰 李亚颖 彭冬梅 李国华 朱姝 杨小健 杜丽 王凤阳 CAO Rui-yong;NIE Xin;LI Bao-bao;ZHANG Zhen-xing;HUANG Hai-feng;LI Ya-ying;PENG Dong-mei;LI Guo-hua;ZHU Shu;YANG Xiao-jian;DU Li;WANG Feng-yang

作者机构：海南大学热带农林学院海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室海口市动物基因工程重点实验室海口570228 

基　　金：国家肉羊产业技术体系(CARS-38) 海南省重大科技计划项目(ZDKJ2016017-01) 

出 版 物：《中国畜牧兽医》 (China Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2017年第44卷第8期

页      码：2234-2240页

摘      要：为克隆羊源类鼻疽伯克霍尔德菌BPSS1512基因,并对其编码的蛋白进行生物信息学分析,以类鼻疽伯克霍尔德菌基因组为模板,参照GenBank中Burkholderia pseudomallei K96243株基因组DNA序列(登录号:NC_006351.1)设计引物,PCR扩增BPSS1512基因,构建重组质粒,SDS-PAGE和Western blotting分析其蛋白表达,DNAMAN等软件对BPSS1512基因编码的氨基酸序列进行分析。结果显示,PCR扩增成功得到1 425bp的特异性条带,BamHⅠ和HindⅢ双酶切后得到约为5 000和1 500bp的条带,表明重组质粒pET-28a-BPSS1512构建成功,IPTG浓度为10mmol/L,诱导时间8h为最适宜的诱导条件。BPSS1512基因编码的蛋白质分子质量为53ku,在包涵体中表达;在BPSS1512蛋白二级结构中,α-螺旋、延伸链和无规卷曲分别占24.05%、14.77%、61.18%,并且疏水性区域分布在-2.0^+2.4之间,说明BPSS1512蛋白具有较强的疏水性,本试验结果可为类鼻疽病的防制提供参考依据。

主 题 词：类鼻疽伯克霍尔德菌 BPSS1512基因 克隆 原核表达 生物信息学分析 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.08.003

馆 藏 号：203255174...