细粒棘球蚴AgB亚单位抗原基因的克隆和表达系统的优化

作     者：江莉 冯正 许学年 薛海筹 冯宇 JIANG Li;FENG Zheng;XU Xue-nian;XUE Hai-chou;FENG Yu

作者机构：中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所上海200025 甘肃省疾病预防控制中心兰州730020 

出 版 物：《热带医学杂志》 (Journal of Tropical Medicine)

年 卷 期：2007年第7卷第6期

页      码：539-542页

摘      要：目的从我国细粒棘球绦虫分离株(新疆源和甘肃源)中克隆AgB1和AgB2两个亚单位基因,并试用不同的表达载体对两个AgB亚单位基因的表达情况进行比较观察。方法设计特异性引物,扩增AgB1和AgB2亚单位抗原基因,分别用pET28a(+)、pET32a(+)和pGEX4T-13种表达载体构建重组质粒,对AgB亚单位基因在不同载体中的表达情况进行比较。结果从我国细粒棘球绦虫分离株中克隆的AgB1和AgB2抗原基因与GenBank中的序列比对,AgB1与德国人源、巴西羊源、意大利牛源均有一定的核苷酸和氨基酸差异;AgB2与乌拉圭羊源序列完全一致。在3种载体中表达重组蛋白的结果显示,不同载体和表达系统对重组表达蛋白的生物活性和可溶性有较大的影响。结论成功地克隆了细粒棘球蚴AgB亚单位基因,AgB1和AgB2基因在3种不同表达载体中的表达情况及对融合标签蛋白的血清基础反应性的比较分析表明,两个重组抗原在pET32a载体中的表达优于pET28a和pGEX4T-1载体。

主 题 词：细粒棘球蚴 AgB亚单位抗原 基因克隆 表达系统 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-3619.2007.06.011

馆 藏 号：203255313...