细胞内氯通道4基因siRNA表达载体的构建及其沉默效应

作     者：袁兆新 康劲松 孔晓霞 张宏宇 李洪岩 郑花 张勇 苏静 孙连坤 

作者机构：吉林大学基础医学院病理生理教研室吉林长春130021 长春医学高等专科学校吉林长春130031 

基　　金：国家自然科学基金项目资助(30570687) 吉林省科技厅基金资助项目(200505139) 吉林省教育厅"十一五"科学技术研究项目 

出 版 物：《中国实验诊断学》 (Chinese Journal of Laboratory Diagnosis)

年 卷 期：2009年第13卷第2期

页      码：146-149页

摘      要：目的构建针对细胞内氯通道4(CLIC4)的短链干涉RNA(siRNA)及其表达载体,转染细胞后观察其对CLIC4基因的干涉作用。方法设计CLIC4靶向的发夹状siRNA,据此设计合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接到pSilencer3.1-H1载体,转化扩增后进行序列测定。用脂质体转染法转染大鼠神经胶质瘤细胞C6,通过RT-PCR检测CLIC4基因表达水平的变化。结果酶切鉴定与DNA测序分析证明CLIC4基因的siRNA载体构建正确,RT-PCR结果表明CLIC4基因的表达水平明显降低。结论成功地构建了针对CLIC4基因的siRNA载体,转染细胞后可显著抑制CLIC4基因表达。

主 题 词：短链干涉RNA RNA干涉 细胞内氯通道4 神经胶质瘤 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-4287.2009.02.002

馆 藏 号：203255817...