正交设计优化缩叶藓属植物的ISSR-PCR反应体系

作     者：沙伟 王助文 曹同 SHA Wei;WANG Zhu-wen;CAO Tong

作者机构：齐齐哈尔大学生命与科学工程学院黑龙江齐齐哈尔161006 上海师范大学生命与环境科学学院上海200234 

基　　金：国家自然科学基金项目("世界缩叶藓属植物的分子生物地理学与系统发育研究" No.30770141)资助 

出 版 物：《生物技术》 (Biotechnology)

年 卷 期：2009年第19卷第5期

页      码：32-34页

摘      要：目的:建立缩叶藓属(Ptychomitrium)植物ISSR-PCR反应的最佳体系。方法:利用正交设计实验的方法,采用引物562,10号材料Ptychomitrium gardneri为模板对缩叶藓属植物的ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素(Mg2+d、NTPs、引物、模板量、Taq酶量)在4个水平上进行体系优化。结果:确定了缩叶藓属(Ptychomitrium)植物ISSR-PCR反应的最佳体系(25μl)为:Mg2+浓度为3.2mmol/L、dNTPs浓度为0.96mmol/L、引物浓度为1.04μmol/L、模板量10ng、Taq酶量1.5U。利用该体系,采用引物564在16个材料中能有效扩增。结论:这一优化体系的建立为以后缩叶藓属植物的ISSR遗传多样性的分析奠定了基础。

主 题 词：正交设计 ISSR-PCR 缩叶藓 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.16519/j.cnki.1004-311x.2009.05.007

馆 藏 号：203256222...