黄瓜芽黄突变相关基因ClpP克隆及植物表达载体构建

作     者：朱伟伟 陈远良 陈芳 高剑峰 Zhu Weiwei;Chen Yuanliang;Chen Fang;Gao Jianfeng

作者机构：石河子大学生命科学学院新疆石河子832000 新疆石河子蔬菜研究所新疆石河子832000 

基　　金：国家人事部留学人员科技活动择优资助项目(05002-500002142508) 黄瓜芽黄基因的筛选及芽黄现象调控的分子机制 

出 版 物：《中国农学通报》 (Chinese Agricultural Science Bulletin)

年 卷 期：2011年第27卷第16期

页      码：146-150页

摘      要：为了获得黄瓜中ClpP基因的cDNA全序列,研究其与黄瓜芽黄突变现象的关系,采用TRNzol法提取芽黄突变的黄瓜叶片总RNA,并以其为模板反转录合成cDNA第一链。根据NCBI预测的黄瓜ClpP基因序列设计并合成1对特异引物,通过PCR扩增得到目的条带后测序,并构建植物表达载体;成功获得黄瓜中ClpP基因的cDNA全序列,并提交到NCBI。该基因编码区全长495bp,共编码氨基酸158个。预测其理论等电点为5.22,理论蛋白质分子量为41.00356 KDa,编码的蛋白包含S14_ClpP_2保守结构域,无信号肽。通过与其他植物Clp蛋白酶的氨基酸序列比对发现与毛茛属植物的Clp蛋白酶同源性较高。并成功构建了以CaMV35S为启动子的植物表达载体pBI121-ClpP。黄瓜中ClpP基因的cDNA全序列的获得说明该基因在黄瓜中确实存在,这是首次克隆得到了黄瓜中的ClpP基因的cDNA全序列。

主 题 词：ClpP 植物表达载体 载体构建 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 071001[071001] 07[理学] 

馆 藏 号：203256913...