猪流行性腹泻病毒E基因真核表达载体的构建与鉴定

作     者：付通超 万红平 程渝 颜其贵 

作者机构：四川农业大学动物医学院四川雅安625014 四川农业大学动物生物技术中心 

出 版 物：《畜牧兽医杂志》 (Journal of Animal Science and Veterinary Medicine)

年 卷 期：2012年第31卷第4期

页      码：10-13页

摘      要：(目的)构建猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)E基因真核表达载体pCI-E,为探讨E基因的功能奠定基础。(方法)根据GenBank上已发表的PEDV CV777株序列,利用Primer5.0设计1对两端含限制性核酸内切酶EcoR I和Sal I酶切位点的特异引物,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出完整的231bp的目的基因,将目的基因与pMD19-T载体连接转化到大肠杆菌DH5α中,用测序、PCR、双酶切鉴定阳性克隆体。然后将纯化后的E基因插入表达载体(pCI-neo)上,并经双酶切、测序鉴定。(结果)成功构建了PEDV的pCI-E重组真核表达载体。(结论)pCI-E重组真核表达载体的构建为进一步探讨PEDV E基因的功能和分子生物学特性及PED防御新途径提供依据。

主 题 词：猪流行性腹泻病毒 E基因 真核表达载体 构建 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-6704.2012.04.004

馆 藏 号：203257498...