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皮肤感染性肉芽肿常见病原菌微孔板反向杂交检测法的研究

皮肤感染性肉芽肿常见病原菌微孔板反向杂交检测法的研究

作     者:闫桢桢 姜海琴 孙建方 沈永年 崔盘根 刘伟军 王洪生 刘维达 Yan Zhenzhen;Jiang Haiqin;Sun Jianfang;Shen Yongnian;Cui Pangen;Liu Weijun;Wang Hongsheng

作者机构:中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所南京210042 

基  金:卫生部部属(管)医院临床学科重点项目(2010-2012-125) 

出 版 物:《中华皮肤科杂志》 (Chinese Journal of Dermatology)

年 卷 期:2014年第47卷第9期

页      码:633-636页

摘      要:目的 探讨微孔板反向分子杂交技术与PCR-ELISA相结合的"拟芯片"法检测和鉴定皮肤感染性肉芽肿常见病原菌的方法.方法 选取、设计真菌和分枝杆菌两对通用引物,及10种皮肤感染性肉芽肿常见的病原菌:结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌、海鱼分枝杆菌、偶遇分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、申克孢子丝菌、卡氏枝孢霉、裴氏着色真菌、***、白念珠菌的特异性探针;采用标准株验证通用引物、特异性探针并检测"拟芯片"法的敏感性、特异性;对19株临床分离株进行检测和鉴定.结果 两对通用引物均可扩增出对应的菌种基因序列,PCR产物经测序分析与预期相符;"拟芯片"法检测阴性标本吸光度为0.041±0.02,公式计算得临界值为0.101,在此基础上测得其敏感性为1×10~1×102个菌细胞/ml.各病原菌与相应的探针杂交,吸光度均> 0.101,为阳性;而与非对应的探针杂交,则吸光度<0.101,为阴性,特异性高;对临床分离株的菌种鉴定准确率高.结论 "拟芯片"法可应用于皮肤感染性肉芽肿常见病原菌的实验室快速检测和鉴定.

主 题 词:肉芽肿 分枝杆菌感染 真菌感染 寡核苷酸反向杂交技术 

学科分类:1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2014.09.007

馆 藏 号:203258589...

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