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小片段干扰RNA抑制人肝癌细胞株中YAP基因表达的研究

小片段干扰RNA抑制人肝癌细胞株中YAP基因表达的研究

作     者:张素青 陈橼 张一心 刘继斌 朱烨菁 钱俊 李德春 ZHANG Suqing;CHEN Yuan;ZHANGYixin;LIU Jibin;ZHUYejing;QIAN Jun;LI Dechun

作者机构:苏州大学附属第一医院普外科江苏苏州215006 江苏省南通市肿瘤医院普外科江苏南通226361 南通大学临床医学系江苏南通226019 

基  金:江苏省南通市社会发展科技计划项目(编号:K2010011) 

出 版 物:《中国临床医学》 (Chinese Journal of Clinical Medicine)

年 卷 期:2014年第21卷第6期

页      码:643-646页

摘      要:目的:研究用小片段干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制肝癌细胞株中YAP(yes-associated protein)表达后肝癌细胞株对阿霉素(adriamycin,ADM)的敏感性变化。方法:设计YAP基因的siRNA序列,用脂质体LipofectamineTM2000将siRNA转染至4株肝癌细胞株PLC/PRF/5、Huh-7、MHCC97H、MHCC97L中,在荧光显微镜下观察并采用蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测肝癌细胞株中YAP的表达。将细胞以不同浓度的ADM处理后,采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thialzolyl tetrazolium,MTT)比色法检测细胞的存活率。结果:成功构建针对YAP的siRNA表达载体。Western blotting结果显示,肝癌细胞株经特异性siRNA转染后,YAP蛋白的表达受到抑制,表明RNA干扰(RNA interference,RNAi)能特异、有效地抑制肝癌细胞株中YAP的表达。MTT结果显示,转染YAP siRNA后肝癌细胞株的存活率受到明显抑制。结论:siRNA抑制肝癌细胞株中YAP的表达可增强肝癌细胞株对ADM的敏感性。

主 题 词:小干扰RNA YAP 肝癌细胞 阿霉素 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

馆 藏 号:203258893...

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