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IL-21编码基因的克隆及其在大肠杆菌中表达

IL-21编码基因的克隆及其在大肠杆菌中表达

作     者:付强 钱冬萌 闫志勇 侯伟 赵百慧 王斌 

作者机构:青岛大学医学院微生物学教研室青岛266021 

基  金:山东省自然科学基金重点资助项目 (E99C0 2 ) 

出 版 物:《青岛大学医学院学报》 (Acta Academiae Medicinae Qingdao Universitatis)

年 卷 期:2003年第39卷第1期

页      码:15-17页

摘      要:①目的 利用基因工程技术从人扁桃体细胞cDNA中克隆出白细胞介素 2 1(IL 2 1)的编码基因 ,并在大肠杆菌中进行表达。②方法 以人扁桃体细胞经PHA刺激的cDNA文库为模板 ,经PCR获得IL 2 1的全基因片段。测序确认后 ,分别设计含BamHⅠ和SalⅠ酶切位点的引物 ,经PCR获得IL 2 1成熟肽的编码基因。将此IL 2 1基因插入表达载体 pGEX4T 2 ,重组克隆经酶切与测序确认后转化大肠杆菌DH5α进行IPTG诱导表达。 ③结果 琼脂糖凝胶电泳显示重组质粒的PCR和双酶切产物与理论值的大小相等。SDS PAGE显示经IPTG诱导后的大肠杆菌DH5α亦表达一与理论相符的条带。目的蛋白约占总菌体蛋白的 10 %。④结论 成功地构建了IL 2

主 题 词:白细胞介素21  基因表达 聚合酶链反应 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.3969/j.issn.1672-4488.2003.01.006

馆 藏 号:203259479...

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