实时荧光PCR技术在沙门菌种间鉴别中的应用

作     者：袁慕云 许龙岩 柯碧霞 刘二龙 孙薇 YUAN Mu-yun;XU Long-yan;KE Bi-xia;LIU Er-long;SUN Wei

作者机构：广东检验检疫技术中心广东广州510623 广东省疾病预防控制中心广东广州511430 黄埔出入境检验检疫局广东广州510530 

基　　金：广东省科技项目计划(2013B040402004) 

出 版 物：《中国卫生检验杂志》 (Chinese Journal of Health Laboratory Technology)

年 卷 期：2017年第27卷第16期

页      码：2291-2294页

摘      要：目的探讨用实时荧光PCR对沙门菌进行种间鉴别。方法根据猪霍乱沙门菌(Salmonella Choleraesuis,SC)和丙型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi C,SP)的共有序列(Gen Bank:AE017220.1),伤寒沙门菌(Salmonella Typhi,ST;Gen Bank:NC_016832.1)和鸡伤寒沙门菌(Salmonella Gallinarum,SG;Gen Bank:HQ703462)的特异序列分别设计SCP、STP、SGP引物和Taq Man探针,在探针的5 端分别标记FAM、HEX、TET,建立基于Taq Man探针多重荧光PCR检测方法。同时,根据SC和SP差异序列(Gen Bank:CP000857)设计SPP引物和探针,在探针的5 端标记ROX,区分SC和SP。结果 SCP特异性扩增出25株SC和22株SP,STP和SGP分别扩增出31株ST和34株SG,而其他不同血清型沙门菌和非沙门菌扩增结果阴性。SPP扩增出22株SP,25株SC扩增结果阴性。扩增体系评价结果,SCP、STP、SGP和SPP扩增效率均在80%~100%,线性相关系数r2≥0.994。结论建立的方法特异性强、敏感性高,可用于SC、SP、ST、SG的种间鉴别。

主 题 词：实时荧光PCR 猪霍乱沙门菌 丙型副伤寒沙门菌 伤寒沙门菌 鸡伤寒沙门菌 种间鉴别 

学科分类：100208[100208] 1002[医学-临床医学类] 10[医学] 

馆 藏 号：203260353...