利用酵母单杂交筛选拟南芥AtSTK基因表达调控蛋白的研究

作     者：杨歌 惠颖 赵翠 田梦涵 任媛媛 黄占景 葛荣朝 YANG Ge;HUI Ying;ZHAO Cui;TIAN Menghan;REN Yuanyuan;HUANG Zhanjing;GE Rongchao

作者机构：河北师范大学生命科学学院河北石家庄050024 石药集团中奇制药技术有限公司河北石家庄050035 

基　　金：国家自然科学基金项目(30900104) 河北省自然科学基金项目(C2016205158) 

出 版 物：《华北农学报》 (Acta Agriculturae Boreali-Sinica)

年 卷 期：2017年第32卷第4期

页      码：73-77页

摘      要：拟南芥丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因AtSTK的过量表达可以明显提高拟南芥的耐盐性。为进一步研究AtSTK基因表达的调控机制,以拟南芥基因组DNA为模板设计引物,扩增获得AtSTK基因的启动子序列,并构建到报告载体pAbAi,将重组报告载体质粒pAbAi-HYT利用BstbⅠ进行单酶切线性化,转化酵母菌株Y1H Gold,线性化的pAbAi-HYT整合到基因组中。然后,将纯化的拟南芥双链cDNA、pGADT7-Rec载体共转化含有报告载体pAbAi-HYT的酵母菌,将菌液涂布到含有100 ng/m L Ab A的SD/-Leu培养基上进行阳性克隆的酵母单杂交筛选。通过回复鉴定、序列测定,最终筛选获得了可能参与AtSTK基因表达调控的4个拟南芥基因。测序结果表明,酵母单杂交筛选获得的拟南芥基因AT3G32090含有WRKY转录因子保守结构域,为WRKY类转录因子的一员。因此,AtSTK基因的表达很可能接受MAPK信号传导途径中AT3G32090基因编码的WRKY类转录因子的调控,从而影响拟南芥植株的耐盐性。

主 题 词：AtSTK 启动子 表达调控蛋白 酵母单杂交 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071007[071007] 

核心收录：

D　O　I：10.7668/hbnxb.2017.04.012

馆 藏 号：203260511...