双重荧光RPA扩增方法快速鉴别两种血清型水泡性口炎病毒

作     者：林彦星 曹琛福 曾少灵 杨俊兴 吕建强 刘丽娟 花群义 LIN Yanxing;CAO Chenfu;ZENG Shaoling;YANG Junxing;LV Jianqiang;LIU Lijuan;HUA Qunyi

作者机构：深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心深圳518045 中国检验检疫科学研究院北京100176 

基　　金："十三五"国家重点研发计划课题(项目号:2016YFC1200905) 题目:重要新发突发病原体应急处置方案与规范研究 "十三五"国家重点研发计划课题(项目号:2016YFD0500708) 题目:猪重要疫病分子检测技术研究~~ 

出 版 物：《病毒学报》 (Chinese Journal of Virology)

年 卷 期：2017年第33卷第5期

页      码：712-719页

摘      要：本研究利用重组酶聚合酶扩增(RPA)技术,根据水泡性口炎病毒印第安纳型(VSV-IND)和新泽西型(VSVNJ)相对保守的L基因为靶序列设计并筛选出两套特异性的引物和探针,建立了快速鉴别检测水泡性口炎病毒两种血清型的双重荧光RT-RPA方法。试验结果表明,该方法特异性强,与猪水泡病病毒(SVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)、蓝舌病病毒(BTV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、猪瘟病毒(CSFV)等灭活抗原核酸无交叉反应;灵敏度高,最低可检测核酸浓度为12.7fg/μL;简便快速,反应时间短(<15min),且重复性好。利用所建立方法对124份临床样品进行检测,结果与双重荧光RT-PCR一致。本文为VSV-IND和VSV-NJ的快速鉴别检测提供一种新方法,尤其适合现场检疫或基层实验室的快速检测。

主 题 词：水泡性口炎病毒(VSV) 重组酶聚合酶扩增(RPA) 鉴别检测 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003207

馆 藏 号：203260759...