H9N2亚型禽流感荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

作     者：杨玲玲 牛凯 王涛 常维山 刘玉庆 YANG Lingling;NIU Kai;WANG Tao;CHANG Weishan;LIU Yuqing

作者机构：山东农业大学动物科技学院预防兽医细胞免疫实验室山东泰安271018 山东省农业科学院畜牧兽医研究所济南250100 

基　　金：山东省农业产业技术创新体系家禽团队岗位经费项目(SDAIT-11-09) 

出 版 物：《黑龙江畜牧兽医》 (Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine)

年 卷 期：2017年第8期

页      码：39-42,287,288页

摘      要：为了研究H9N2亚型禽流感病毒(AIV)在家禽体内各个器官的分布,试验针对H9N2亚型AIV的HA基因设计1对特异性引物,同时设计1对扩增内参基因β-actin的引物,以阳性重组质粒作为标准品做标准曲线,建立荧光定量RT-PCR检测方法,并对人工感染H9N2的SPF雏鸡气管、胸腺、肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、肠等器官进行3次重复检测。结果表明:该法线性关系R值均在0.99以上,检测极限均为10拷贝质粒DNA,比RT-PCR灵敏100倍以上;特异性好,批内和批间重复性试验变异系数均小于1%。通过比较各器官HA相对表达量,得出肠和胰腺中HA相对表达量最高,腺胃次之,脾脏、肝脏、胸腺、法氏囊中含量也比较高,气管、肺脏、肾脏中含量较低,其中肾脏含量最低。说明研究建立的H9N2亚型禽流感病毒荧光定量RT-PCR方法灵敏度高,特异性强。

主 题 词：H9N2亚型禽流感病毒 HA基因 RT-PCR 检测 病毒分布 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 090601[090601] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2017.1318

馆 藏 号：203260782...