CRISPR-Cas9多靶点载体构建及高效定向编辑水稻苯达松抗性基因CYP81A

作     者：聂旺 彭威 余雅心 张焕 陈秋生 刘长爱 廖鹏飞 Nie Wang;Peng Wei;Yu Yaxin;Zhang Huan;Chen Qiusheng;Liu Changai;Liao Pengfei

作者机构：南昌大学生命科学学院江西省分子生物学与基因工程重点实验室南昌330031 

基　　金：南昌大学“创新创业训练计划”项目、南昌大学研究生创新专项资金(cx2016193) 江西省研究生创新专项资金(YC2016-S063)共同资助 

出 版 物：《基因组学与应用生物学》 (Genomics and Applied Biology)

年 卷 期：2017年第36卷第8期

页      码：3065-3070页

摘      要：水稻CYP81A6基因(Bel)编码的细胞色素P450单加氧酶对苯达松和磺酰脲类除草剂具有抗性,该基因的隐性纯合突变体(bel)表现为苯达松敏感致死性,可作为植物化学致死标记,在水稻杂交制种中具有重要的应用价值。本研究在CYP81A6基因的首个外显子中设计两个靶位点,构建了含多靶点的CRISPR-Cas9载体,通过根癌农杆菌介导法转化粳稻中花11,获得了56株转基因T0代阳性植株,提取其中9株基因组DNA进行靶位点测序检测,发现基因敲除突变率为77.8%,其中纯合突变率高达71.4%,对纯合突变体水稻喷施苯达松,均表现出对苯达松敏感致死。为应用CRISPR-Cas9技术培育苯达松敏感致死水稻不育系和对其他水稻基因进行编辑提供理论依据。

主 题 词：苯达松 CRISPR-Cas9 基因编辑 Bel基因 CYP81A6基因 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13417/j.gab.036.003065

馆 藏 号：203260788...