蓝舌病病毒和鹿流行性出血热病毒双重荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作     者：刘佳佳 王慧煜 艾军 韩雪清 LIU Jia-jia;WANG Hui-yu;AI Jun;HAN Xue-qing

作者机构：中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所北京100176 云南出入境检验检疫局检验检疫技术中心云南昆明650228 

基　　金："十二五"国家科技支撑计划项目(2013BAD12B03) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2017年第47卷第9期

页      码：1124-1128页

摘      要：为建立可同时检测蓝舌病病毒(BTV)和鹿流行性出血热病毒(EHDV)的快速诊断方法,本研究根据BTV和EHDV保守基因序列设计特异性引物和探针,建立了双重荧光定量RT-PCR,对该方法进行反应条件、特异性及敏感性的验证,并用该方法对部分已知临床样品进行检测。结果显示,该方法与口蹄疫病毒、水泡性口炎病毒、小反刍兽疫病毒等牛、羊常见疾病病原无交叉反应;对两种重组质粒标准品的检出极限均为1×10~2copies/L;批内和批间重复试验的变异系数均小于2.55%。临床试验表明,该方法能够快速准确地检测出临床组织样品中BTV和EHDV的核酸。结果表明,本研究建立的检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,可以为BTV和EHDV的快速鉴别检测及流行病学调查提供有效的技术手段。

主 题 词：蓝舌病病毒 鹿流行性出血热病毒 双重荧光定量RT-PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2017.09.009

馆 藏 号：203262192...