25型蓝舌病病毒VP2蛋白的原核表达及鉴定

作     者：谢双羽 武啸 臧明鑫 李佳璇 徐义刚 姜艳平 崔文 李一经 唐丽杰 XIE Suangyu WU Xiao ZANG Mingxin LI Jiaxuan XU Yigang JIANG Yanping CUI Wen LI Yijing TANG Lijie

作者机构：东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 

基　　金："十二五"国家科技支撑计划(2013BAD12B01) 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2017年第49卷第9期

页      码：83-87页

摘      要：为获得体外表达的25型蓝舌病病毒(BTV)VP2蛋白,本研究以NCBI上发表的25型BTV L2基因序列为模版,设计3对引物,PCR扩增3段部分重叠基因。将3段基因克隆到原核表达载体p ET-28a(+)中,构建重组质粒。以1.0 mmol/L的IPTG诱导含有阳性质粒的重组菌p ET-28a(+)-VP2-A/BL21、p ET-28a(+)-VP2-B/BL21、p ET-28a(+)-VP2-C/BL21进行表达,获得3段VP2蛋白,分别命名为VP2-A、VP2-B、VP2-C。经SDS-PAGE鉴定结果表明,重组蛋白以包涵体形式表达,大小依次为50 ku、48 ku、48 ku,与预期蛋白大小一致。经Western blot分析,VP2-A、VP2-B、VP2-C与His-Tag单抗发生特异性结合,证明其具有较好的反应原性。25型蓝舌病病毒VP2蛋白的分段表达为VP2蛋白的功能研究和制备蓝舌病的诊断试剂奠定了基础。

主 题 词：蓝舌病病毒 25型 VP2蛋白 原核表达 鉴定 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203262826...